PLA2R、C1q、THSD7A融合蛋白及其構(gòu)建方法、應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202011014743.6 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)(公告)號(hào) CN112111015B 公開(kāi)(公告)日 2021-12-07
申請(qǐng)公布號(hào) CN112111015B 申請(qǐng)公布日 2021-12-07
分類號(hào) C07K19/00(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I;C12N15/85(2006.01)I;C12N5/10(2006.01)I;G01N33/68(2006.01)I 分類 有機(jī)化學(xué)〔2〕;
發(fā)明人 秦楓;蔣洪嬌;周志瓊;顏松;張小飛;周玥;黃敬雙;張偉;萬(wàn)文琴;鮮靜;吳斌 申請(qǐng)(專利權(quán))人 四川攜光生物技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 成都行之專利代理事務(wù)所(普通合伙) 代理人 唐邦英
地址 215000 江蘇省蘇州市中國(guó)(江蘇)自由貿(mào)易試驗(yàn)區(qū)蘇州片區(qū)蘇州工業(yè)園區(qū)新平街388號(hào)21幢7層01單元
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)了PLA2R、C1q、THSD7A融合蛋白及其構(gòu)建方法、應(yīng)用,構(gòu)建方法包括以下步驟:S1、依次連接PLA2R、THSD7A、C1q核苷酸序列獲得目的基因,C1q重復(fù)三次,PLA2R、THSD7A之間加入Linker序列,THSD7A、C1q之間加入Linker序列,相鄰C1q之間加入Linker序列;S2、在目的基因前加入真核KOZAK序列,在上游加入限制性核酸內(nèi)切酶位點(diǎn)BamⅠ,在下游加入NotⅠ酶切位點(diǎn),C端加入6*His標(biāo)簽序列,根據(jù)哺乳細(xì)胞偏好設(shè)計(jì)全序列基因;S3、將步驟S2獲得的全序列基因與質(zhì)粒進(jìn)行雙酶切獲得酶切產(chǎn)物;S4、將步驟S3獲得的酶切產(chǎn)物通過(guò)T4連接酶連接,獲得重組質(zhì)粒;S5、將重組質(zhì)粒在哺乳細(xì)胞中表達(dá)獲得PLA2R、C1q、THSD7A融合蛋白。通過(guò)本發(fā)明所述方法構(gòu)建的融合蛋白能提高檢測(cè)試劑盒的靈敏度和特異性,減少漏檢和錯(cuò)檢。