一種L-蘇氨酸轉(zhuǎn)醛酶突變體的高通量快速篩選方法
基本信息
| 申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN201911342288.X | 申請(qǐng)日 | - |
| 公開(kāi)（公告）號(hào) | CN110904188A | 公開(kāi)（公告）日 | 2020-03-24 |
| 申請(qǐng)公布號(hào) | CN110904188A | 申請(qǐng)公布日 | 2020-03-24 |
| 分類(lèi)號(hào) | C12Q1/48;C12Q1/32 | 分類(lèi) | 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程; |
| 發(fā)明人 | 林娟;許煉;王力超;許鑫琦;陳承滔;賴凌燕 | 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人 | 福建昌生生物科技發(fā)展有限公司 |
| 代理機(jī)構(gòu) | 福州旭辰知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） | 代理人 | 福州大學(xué);福建昌生生物科技發(fā)展有限公司 |
| 地址 | 350116 福建省福州市閩侯縣上街鎮(zhèn)大學(xué)城學(xué)園路2號(hào)福州大學(xué)新區(qū) | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 本發(fā)明公開(kāi)了一種L?蘇氨酸轉(zhuǎn)醛酶突變體的高通量快速篩選方法，屬于生物化學(xué)和酶工程領(lǐng)域。本發(fā)明取乙醛及乙醇脫氫酶反應(yīng)液，隨即置于酶標(biāo)儀中檢測(cè)OD340nm隨時(shí)間的變化情況，計(jì)算OD340nm下降的平均反應(yīng)速率VOD340nm，以乙醛濃度為自變量x，VOD340nm為因變量y，得到回歸方程y＝ax，以及乙醛標(biāo)準(zhǔn)曲線。轉(zhuǎn)醛反應(yīng)液、L?蘇氨酸轉(zhuǎn)醛酶突變體全細(xì)胞反應(yīng)液，充分混勻反應(yīng)結(jié)束后，離心除去細(xì)胞沉淀，取上清液和乙醇脫氫酶反應(yīng)液，隨即置于酶標(biāo)儀中檢測(cè)OD340nm隨時(shí)間的變化情況，計(jì)算OD340nm下降的平均速率VOD340nm；通過(guò)VOD340nm計(jì)算得到反應(yīng)液中乙醛的濃度，以乙醛濃度的高低來(lái)篩選L?蘇氨酸轉(zhuǎn)醛酶突變體。本發(fā)明不受反應(yīng)液中的雜質(zhì)干擾，靈敏度和準(zhǔn)確性高，重復(fù)性好，操作簡(jiǎn)便，便于推廣應(yīng)用。 |
