一種L-蘇氨酸轉(zhuǎn)醛酶突變體的高通量快速篩選方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201911342288.X 申請日 -
公開（公告）號 CN110904188A 公開（公告）日 2020-03-24
申請公布號 CN110904188A 申請公布日 2020-03-24
分類號 C12Q1/48;C12Q1/32 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 林娟;許煉;王力超;許鑫琦;陳承滔;賴凌燕 申請（專利權(quán)）人 福建昌生生物科技發(fā)展有限公司
代理機構(gòu) 福州旭辰知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 福州大學(xué);福建昌生生物科技發(fā)展有限公司
地址 350116 福建省福州市閩侯縣上街鎮(zhèn)大學(xué)城學(xué)園路2號福州大學(xué)新區(qū)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種L?蘇氨酸轉(zhuǎn)醛酶突變體的高通量快速篩選方法，屬于生物化學(xué)和酶工程領(lǐng)域。本發(fā)明取乙醛及乙醇脫氫酶反應(yīng)液，隨即置于酶標儀中檢測OD340nm隨時間的變化情況，計算OD340nm下降的平均反應(yīng)速率VOD340nm，以乙醛濃度為自變量x，VOD340nm為因變量y，得到回歸方程y＝ax，以及乙醛標準曲線。轉(zhuǎn)醛反應(yīng)液、L?蘇氨酸轉(zhuǎn)醛酶突變體全細胞反應(yīng)液，充分混勻反應(yīng)結(jié)束后，離心除去細胞沉淀，取上清液和乙醇脫氫酶反應(yīng)液，隨即置于酶標儀中檢測OD340nm隨時間的變化情況，計算OD340nm下降的平均速率VOD340nm；通過VOD340nm計算得到反應(yīng)液中乙醛的濃度，以乙醛濃度的高低來篩選L?蘇氨酸轉(zhuǎn)醛酶突變體。本發(fā)明不受反應(yīng)液中的雜質(zhì)干擾，靈敏度和準確性高，重復(fù)性好，操作簡便，便于推廣應(yīng)用。