檢測膠質(zhì)瘤中基因甲基化的方法
基本信息
申請?zhí)?/td> | CN202010281022.5 | 申請日 | - |
公開(公告)號 | CN111394439A | 公開(公告)日 | 2020-07-10 |
申請公布號 | CN111394439A | 申請公布日 | 2020-07-10 |
分類號 | C12Q1/6858(2018.01)I | 分類 | - |
發(fā)明人 | 王樹;馬立新;劉禮兵;于春江;張宏偉 | 申請(專利權(quán))人 | 北京三博腦科醫(yī)院有限公司 |
代理機構(gòu) | 北京潤平知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 | 代理人 | 中國科學(xué)院化學(xué)研究所;首醫(yī)大三博腦科醫(yī)院(北京)有限公司 |
地址 | 100190北京市海淀區(qū)中關(guān)村北一街2號 | ||
法律狀態(tài) | - |
摘要
摘要 | 本發(fā)明涉及基因檢測領(lǐng)域,公開了一種檢測膠質(zhì)瘤中基因甲基化的方法,該方法包括以下步驟:(1)用特異性識別和切斷未甲基化位點的限制性內(nèi)切酶處理DNA標準品;(2)通過PCR擴增所述酶切產(chǎn)物;(3)將PCR產(chǎn)物與陽離子共軛聚合物結(jié)合,以使PCR產(chǎn)物發(fā)生熒光能量共振轉(zhuǎn)移,并分別檢測陽離子共軛聚合物和熒光素的熒光強度;(4)根據(jù)所述熒光強度計算膠質(zhì)瘤中基因甲基化水平E值;(5)建立甲基化程度定量標準化曲線,確定最優(yōu)檢測條件,并在最優(yōu)檢測條件下對待檢測的膠質(zhì)瘤DNA樣品進行檢測;(6)判定所述膠質(zhì)瘤DNA樣品的甲基化程度,進行聯(lián)合分析,評估膠質(zhì)瘤CpG島甲基化表現(xiàn)型。該方法可以實現(xiàn)高靈敏、低成本檢測膠質(zhì)瘤基因的甲基化程度的目的。?? |
