檢測(cè)膠質(zhì)瘤中基因甲基化的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202010281022.5 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN111394439B 公開（公告）日 2021-08-20
申請(qǐng)公布號(hào) CN111394439B 申請(qǐng)公布日 2021-08-20
分類號(hào) C12Q1/6858 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 王樹;馬立新;劉禮兵;于春江;張宏偉 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 北京三博腦科醫(yī)院有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京潤(rùn)平知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 劉依云;喬雪微
地址 100190 北京市海淀區(qū)中關(guān)村北一街2號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及基因檢測(cè)領(lǐng)域，公開了一種檢測(cè)膠質(zhì)瘤中基因甲基化的方法，該方法包括以下步驟：（1）用特異性識(shí)別和切斷未甲基化位點(diǎn)的限制性內(nèi)切酶處理DNA標(biāo)準(zhǔn)品；（2）通過(guò)PCR擴(kuò)增所述酶切產(chǎn)物；（3）將PCR產(chǎn)物與陽(yáng)離子共軛聚合物結(jié)合，以使PCR產(chǎn)物發(fā)生熒光能量共振轉(zhuǎn)移，并分別檢測(cè)陽(yáng)離子共軛聚合物和熒光素的熒光強(qiáng)度；（4）根據(jù)所述熒光強(qiáng)度計(jì)算膠質(zhì)瘤中基因甲基化水平E值；（5）建立甲基化程度定量標(biāo)準(zhǔn)化曲線，確定最優(yōu)檢測(cè)條件，并在最優(yōu)檢測(cè)條件下對(duì)待檢測(cè)的膠質(zhì)瘤DNA樣品進(jìn)行檢測(cè)；（6）判定所述膠質(zhì)瘤DNA樣品的甲基化程度，進(jìn)行聯(lián)合分析，評(píng)估膠質(zhì)瘤CpG島甲基化表現(xiàn)型。該方法可以實(shí)現(xiàn)高靈敏、低成本檢測(cè)膠質(zhì)瘤基因的甲基化程度的目的。