一種用于基因編輯NK細(xì)胞的mRNA模板及構(gòu)建方法、mRNA的體外轉(zhuǎn)錄方法和應(yīng)用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202110715607.8 申請日 -
公開（公告）號 CN113444744A 公開（公告）日 2021-09-28
申請公布號 CN113444744A 申請公布日 2021-09-28
分類號 C12N15/85（2006.01）I;C12N15/66（2006.01）I;C12N5/10（2006.01）I;C12N5/0783（2010.01）I;C07K14/725（2006.01）I;C07K14/54（2006.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 焦順昌;張嶸;宋文靜;袁翰 申請（專利權(quán)）人 北京鼎成肽源生物技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京高沃律師事務(wù)所 代理人 蘇士瑩
地址 102200北京市昌平區(qū)雙營西路86號院4號樓1至5層1單元101
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種用于基因編輯NK細(xì)胞的mRNA模板及構(gòu)建方法、mRNA的體外轉(zhuǎn)錄方法和應(yīng)用，涉及生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明在mRNA的模板上采用一種線性化質(zhì)粒，省略線性化步驟；在模板中預(yù)先加入PolyA121結(jié)構(gòu)，舍去額外的加尾工作；采用ARCA抗反帽的帽子類似物，在體外轉(zhuǎn)錄過程中同時完成加帽?？傊?，本發(fā)明通過特殊的反應(yīng)體系和特殊線性化質(zhì)粒模板，將mRNA的體外轉(zhuǎn)錄簡化為一步。本發(fā)明減少了mRNA的降解，大大降低了對NK細(xì)胞的刺激性和毒性；帽子類似物大大提高了mRNA的穩(wěn)定性，降低了NK細(xì)胞炎性反應(yīng)。本發(fā)明利用制備得到的mRNA在NK細(xì)胞上可成功過表達(dá)細(xì)胞因子或人工抗原嵌合受體。