乳牙間充質干細胞的制備方法及配合使用的試劑盒

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201610476143.9 申請日 -
公開（公告）號 CN105907711A 公開（公告）日 2016-08-31
申請公布號 CN105907711A 申請公布日 2016-08-31
分類號 C12N5/0775(2010.01)I;A01N1/02(2006.01)I 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 晁若瑜;莊莎莎;王穎 申請（專利權）人 安徽新生命干細胞科技有限公司
代理機構 - 代理人 -
地址 230088 安徽省合肥市高新區(qū)香樟大道168號科技實業(yè)園D4棟
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種乳牙間充質干細胞的制備方法：用生理鹽水和75%酒精對乳牙組織表面進行清洗、消毒，乳牙保存液中保存；乳牙中取牙髓，加入牙髓消化液消化；獲得單細胞懸液；加入細胞培養(yǎng)液，離心清洗，沉淀細胞加入細胞培養(yǎng)液，放入二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；原代細胞達70%融合時，加入細胞洗劑液，晃動培養(yǎng)瓶沖洗細胞，吸棄細胞洗劑液，加入細胞消化液消化，加入細胞培養(yǎng)液終止消化，反復吹打瓶底至細胞完全脫落，加入細胞培養(yǎng)液接種到培養(yǎng)瓶中，放入二氧化碳培養(yǎng)箱內培養(yǎng)，為P1代間充質干細胞；P1代融合達70?80%時，胰蛋白酶消化，收集消化細胞，離心，接種；3d后再經(jīng)胰蛋白酶消化，收集消化細胞，離心，計數(shù)，接種，后P3代細胞生長到80%時收獲細胞凍存。