乳牙間充質(zhì)干細(xì)胞的制備方法及配合使用的試劑盒

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201610476143.9 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN105907711A 公開（公告）日 2016-08-31
申請(qǐng)公布號(hào) CN105907711A 申請(qǐng)公布日 2016-08-31
分類號(hào) C12N5/0775(2010.01)I;A01N1/02(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 晁若瑜;莊莎莎;王穎 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 安徽新生命干細(xì)胞科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) - 代理人 -
地址 230088 安徽省合肥市高新區(qū)香樟大道168號(hào)科技實(shí)業(yè)園D4棟
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種乳牙間充質(zhì)干細(xì)胞的制備方法：用生理鹽水和75%酒精對(duì)乳牙組織表面進(jìn)行清洗、消毒，乳牙保存液中保存；乳牙中取牙髓，加入牙髓消化液消化；獲得單細(xì)胞懸液；加入細(xì)胞培養(yǎng)液，離心清洗，沉淀細(xì)胞加入細(xì)胞培養(yǎng)液，放入二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；原代細(xì)胞達(dá)70%融合時(shí)，加入細(xì)胞洗劑液，晃動(dòng)培養(yǎng)瓶沖洗細(xì)胞，吸棄細(xì)胞洗劑液，加入細(xì)胞消化液消化，加入細(xì)胞培養(yǎng)液終止消化，反復(fù)吹打瓶底至細(xì)胞完全脫落，加入細(xì)胞培養(yǎng)液接種到培養(yǎng)瓶中，放入二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，為P1代間充質(zhì)干細(xì)胞；P1代融合達(dá)70?80%時(shí)，胰蛋白酶消化，收集消化細(xì)胞，離心，接種；3d后再經(jīng)胰蛋白酶消化，收集消化細(xì)胞，離心，計(jì)數(shù)，接種，后P3代細(xì)胞生長(zhǎng)到80%時(shí)收獲細(xì)胞凍存。