篩選超低巖藻糖細(xì)胞系的方法和應(yīng)用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201610194325.7 申請日 -
公開（公告）號 CN106167525A 公開（公告）日 2019-03-19
申請公布號 CN106167525A 申請公布日 2019-03-19
分類號 C07K16/00;C07K16/46;C12N15/85;C12N5/10;A61K39/395 分類 有機(jī)化學(xué)〔2〕;
發(fā)明人 朱曉東;張海濤 申請（專利權(quán)）人 北京軒竹康明生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) - 代理人 -
地址 100176 北京市北京經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)科創(chuàng)六街88號孵化樓509室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 篩選超低巖藻糖細(xì)胞系的方法和應(yīng)用,本發(fā)明提供了構(gòu)建表達(dá)抗體和IgG Fc融合蛋白巖藻糖缺陷型的宿主細(xì)胞方法及抗體和IgG Fc融合蛋白巖藻糖活性的檢測方法，及此類細(xì)胞株的具體應(yīng)用。本發(fā)明通過TALEN（和/或CRISPR）技術(shù)高效敲除生產(chǎn)抗體或IgG Fc融合蛋白工程細(xì)胞中的巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶（FUT8）基因的表達(dá)來實現(xiàn)，通過小扁豆凝集素（LCA）加壓、基因測序、流式細(xì)胞儀篩選方法，獲得巖藻糖高效敲除的宿主細(xì)胞。并將巖藻糖缺陷的CHOK1宿主細(xì)胞株構(gòu)建成表達(dá)抗體蛋白的穩(wěn)定工程細(xì)胞株，獲得抗體蛋白后進(jìn)行糖型分析，結(jié)果表明巖藻糖敲除效率達(dá)99％以上。