一種提高Kunkel反應(yīng)突變效率的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201910814448.X 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN110423745B 公開（公告）日 2021-07-20
申請(qǐng)公布號(hào) CN110423745B 申請(qǐng)公布日 2021-07-20
分類號(hào) C12N15/10 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 劉江海;劉彬;龍爽;何奕佳 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 成都盛世君聯(lián)生物技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 成都行之專利代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 李英
地址 610000 四川省成都市高新區(qū)科園南路88號(hào)12棟7層702號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種提高Kunkel反應(yīng)突變效率的方法，通過對(duì)DNA模板及其突變引物的密碼子進(jìn)行優(yōu)化，降低DNA模板與突變引物互補(bǔ)區(qū)域的GC含量，并減小突變引物互補(bǔ)區(qū)域上、下游的GC含量差異，同時(shí)結(jié)合一個(gè)多級(jí)的退火程序，有效地提高Kunkel反應(yīng)突變效率。實(shí)驗(yàn)證明上述方法能夠顯著提高Kunkel反應(yīng)在單一位點(diǎn)和多位點(diǎn)突變的效率，進(jìn)而有效提高噬菌體展示庫的多樣性和庫容。