NY-ESO-1特異的TCR及其制備方法
基本信息
申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN201910614365.6 | 申請(qǐng)日 | - |
公開(kāi)(公告)號(hào) | CN110468106A | 公開(kāi)(公告)日 | 2019-11-19 |
申請(qǐng)公布號(hào) | CN110468106A | 申請(qǐng)公布日 | 2019-11-19 |
分類(lèi)號(hào) | C12N5/10(2006.01)I; C12N15/85(2006.01)I | 分類(lèi) | 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程; |
發(fā)明人 | 施煒星; 楊春霞 | 申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 | 上海宇研生物技術(shù)有限公司 |
代理機(jī)構(gòu) | 上海三方專(zhuān)利事務(wù)所(普通合伙) | 代理人 | 上海宇研生物技術(shù)有限公司; 江蘇西迪爾生物技術(shù)有限公司 |
地址 | 200333 上海市普陀區(qū)中江路879弄4號(hào)樓401室 | ||
法律狀態(tài) | - |
摘要
摘要 | 本發(fā)明涉及NY?ESO?1特異的TCR及其制備方法,用人工果蠅抗原提呈細(xì)胞負(fù)載NY?ESO?1抗原肽,激活CD8+T細(xì)胞產(chǎn)生CTL細(xì)胞,產(chǎn)生的細(xì)胞毒性CTL細(xì)胞經(jīng)流式分選儀用HLA?A*02:01 NY?ESO?1 Tetramer?SLLMWITQC?APC(MBL,TS?M011?2)及CD8?FITC熒光雙染、進(jìn)行流式檢測(cè),篩選收集雙陽(yáng)性的CTL細(xì)胞,將分選得到的CTL細(xì)胞進(jìn)行單細(xì)胞TCR基因測(cè)序,測(cè)得TCRα和β可變區(qū)基因序列,將TCR基因進(jìn)行優(yōu)化及設(shè)計(jì),將TCR基因的恒定區(qū)改為鼠源,并加上信號(hào)肽,得到TCRα和β鏈的全基因序列,基因合成TCR α和TCR β鏈,以IRES序列連接TCR α和TCR β鏈,使TCRα和TCR β鏈在一個(gè)質(zhì)粒中共同表達(dá),得到TCR基因,將TCR基因進(jìn)行真核表達(dá)。 |
