以CA19-9 cDNA片段為模板制備RNA探針的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201610083165.9 申請日 -
公開（公告）號 CN105567845B 公開（公告）日 2020-05-01
申請公布號 CN105567845B 申請公布日 2020-05-01
分類號 C12Q1/6811;C12Q1/6886;C12N15/11;C12N15/10 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 徐學明;魯隼;馮俊清 申請（專利權(quán)）人 廣州復能基因有限公司
代理機構(gòu) 中科專利商標代理有限責任公司 代理人 張瑩
地址 510663 廣東省廣州市廣州科學城國際企業(yè)孵化器D區(qū)8樓
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種以CA19?9 cDNA為模板制備RNA探針的方法。該方法包括以下步驟：針對CA19?9 mRNA序列篩選多個靶序列，對于每個靶序列設(shè)計至少一對引物，所述引物的PCR擴增產(chǎn)物為多重DNA片段，所述多重DNA片段能包括所有靶序列；從CA19?9 cDNA質(zhì)粒中，采用上述引物，通過PCR擴增得到所述多重DNA片段，純化后混合，作為模板；加入RNA聚合酶和帶有生物素標記的UTP進行反應(yīng)，將UTP摻入產(chǎn)物，純化后得到RNA探針。本發(fā)明得到的cRNA探針能夠全部覆蓋所有靶序列，簡化了探針制備步驟，大幅度縮短整個實驗時間，探針特異性更高，穩(wěn)定性更強，背景信號更低且靈敏度更高。在此基礎(chǔ)上，本發(fā)明提供了一種快速檢測胰腺癌相關(guān)的CA19?9表達的試劑盒。