一種拉鏈?zhǔn)娇裳由焯结樤赾fDNA文庫(kù)構(gòu)建中的應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201910094209.1 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)(公告)號(hào) CN109797196A 公開(kāi)(公告)日 2019-05-24
申請(qǐng)公布號(hào) CN109797196A 申請(qǐng)公布日 2019-05-24
分類(lèi)號(hào) C12Q1/6806(2018.01)I; C40B50/06(2006.01)I; C12N15/01(2006.01)I 分類(lèi) 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 余越美; 蔡萬(wàn)世; 孫永樂(lè) 申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 艾吉泰康生物科技(北京)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京匯知杰知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 代理人 艾吉泰康生物科技(北京)有限公司
地址 102206 北京市昌平區(qū)中關(guān)村生命科學(xué)園生命園路8號(hào)院一區(qū)6號(hào)樓507
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)了一種使用拉鏈?zhǔn)娇裳由焯结樀腸fDNA文庫(kù)構(gòu)建方法,包括:獲得拉鏈?zhǔn)教结?,?’端包括與目標(biāo)DNA單鏈互補(bǔ)配對(duì)的15?20個(gè)堿基,5’端包括頸環(huán)結(jié)構(gòu),所述頸環(huán)結(jié)構(gòu)中互補(bǔ)配對(duì)的堿基數(shù)目為18?50個(gè),所述頸環(huán)結(jié)構(gòu)的環(huán)部從5’?3’方向包括A和U堿基;將DNA樣品打斷成片段,變性成單鏈DNA;所述拉鏈?zhǔn)教结樑c變性后的單鏈DNA進(jìn)行連接反應(yīng),然后進(jìn)行延伸并在延伸鏈的3’端加上A,形成末端封閉的雙鏈DNA復(fù)合物;在進(jìn)行剪切,形成平末端3’都帶有A的雙鏈DNA;將所述雙鏈DNA與接頭連接;對(duì)所述連接接頭的雙鏈DNA進(jìn)行探針捕獲;對(duì)所述捕獲序列進(jìn)行測(cè)序,獲得捕獲序列的測(cè)序結(jié)果。