間日瘧原蟲醛縮酶蛋白單克隆抗體的制備方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201210165773.6 申請日 -
公開(公告)號 CN102690351B 公開(公告)日 2014-07-16
申請公布號 CN102690351B 申請公布日 2014-07-16
分類號 C07K16/40(2006.01)I 分類 有機化學〔2〕;
發(fā)明人 陳東;張海燕;龐醒華 申請(專利權)人 杭州傲銳生物醫(yī)藥科技有限公司
代理機構 浙江杭州金通專利事務所有限公司 代理人 杭州傲銳生物醫(yī)藥科技有限公司;杭州奧泰生物技術股份有限公司
地址 311121 浙江省杭州市余杭區(qū)文一西路1500號1號樓209室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種間日瘧醛縮酶(aldolase)蛋白單克隆抗體的制備方法,該抗體是針對以aldolase蛋白為靶抗原,選擇A、B、C三個優(yōu)勢抗原表位,通過柔性片段連接A、B、C三個優(yōu)勢抗原表位,形成重組子D,并在其上下游分別添加BamHI和XhoI限制性內切酶酶切位點,雙酶切后插入載體PET-28a(+)載體中,構建重組蛋白D表達載體,利用大腸桿菌BL21表達重組蛋白D,免疫Balb/c小鼠,取其脾臟細胞與sp2/0骨髓瘤細胞融合,篩選得到10株穩(wěn)定分泌aldolase蛋白單克隆抗體的雜交瘤細胞株。本發(fā)明所得單克隆抗體能特異性識別間日瘧原蟲aldolase蛋白,可用于間日瘧感染的特異性檢測,特異性高,反應靈敏,實驗成本低,適合高通量快速檢測。