一種用于直接檢測環(huán)境雌激素的轉(zhuǎn)基因斑馬魚的構(gòu)建方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202110086614.6 申請日 -
公開（公告）號 CN112852872A 公開（公告）日 2021-05-28
申請公布號 CN112852872A 申請公布日 2021-05-28
分類號 C12N15/85(2006.01)I;A01K67/027(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 朱家樂;朱曉宇;張勇;李春啟 申請（專利權(quán)）人 杭州環(huán)特生物科技股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) 杭州杭誠專利事務(wù)所有限公司 代理人 尉偉敏;何俊
地址 310051浙江省杭州市濱江區(qū)江陵路88號5幢2樓A區(qū)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及基因工程與環(huán)境科學(xué)領(lǐng)域，公開了一種用于直接檢測環(huán)境雌激素的轉(zhuǎn)基因斑馬魚的構(gòu)建方法，包括：（1）克隆斑馬魚雌激素響應(yīng)元件ERE的DNA序列；（2）構(gòu)建質(zhì)粒Tol2?5×ERE?GFF；（3）胚胎顯微注射及功能驗(yàn)證；（4）Founder篩選；（5）純種篩選培養(yǎng)。按本發(fā)明方法所得的轉(zhuǎn)基因斑馬魚中，雌激素能刺激5×ERE響應(yīng)，激活GFF的表達(dá)，而GFF蛋白可與UAS結(jié)合，進(jìn)而驅(qū)動(dòng)綠色熒光蛋白（EGFP）的表達(dá)，從而達(dá)到方便、直觀、動(dòng)態(tài)檢測環(huán)境雌激素是否存在及其濃度的目的。??