一種重組肺炎球菌溶血素制備及純化的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202110896837.9 申請日 -
公開（公告）號 CN113480622A 公開（公告）日 2021-10-08
申請公布號 CN113480622A 申請公布日 2021-10-08
分類號 C07K14/315（2006.01）I;C07K1/14（2006.01）I;C07K1/18（2006.01）I;C07K1/20（2006.01）I;C07K1/34（2006.01）I;C07K1/36（2006.01）I;C12N15/70（2006.01）I;C12N15/31（2006.01）I;C12P21/02（2006.01）I 分類 有機(jī)化學(xué)〔2〕;
發(fā)明人 孫瑩瑩;吳金軍;方紅春;趙志強(qiáng) 申請（專利權(quán)）人 江蘇坤力生物制藥有限責(zé)任公司
代理機(jī)構(gòu) 上海弼興律師事務(wù)所 代理人 王衛(wèi)彬;黃益澍
地址 215129江蘇省蘇州市高新區(qū)泰山路599號3號樓1樓
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種重組肺炎球菌溶血素的純化方法，其包括以下步驟：（1）粗純化：將精氨酸與表達(dá)所述重組肺炎球菌溶血素的菌體混合，獲得粗產(chǎn)物；在粗純化的體系中，所述精氨酸的終濃度為0.5～0.75M，所述菌體的終濃度為0.2～0.5g/mL；（2）精純化：將所述粗產(chǎn)物經(jīng)弱陰離子交換層析、疏水層析和強(qiáng)陰離子交換層析后，獲得所述重組肺炎球菌溶血素。該方法操作便捷，過程穩(wěn)定可控、目的蛋白表達(dá)量高，純化后的目的蛋白回收率高、純度分析僅為目標(biāo)蛋白單一條帶，且其各項(xiàng)指標(biāo)均符合《中國藥典》（2015版）對重組蛋白的要求，利于大規(guī)模生產(chǎn)。