一種腺病毒載體及其構(gòu)建方法
基本信息
| 申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN201810565182.5 | 申請(qǐng)日 | - |
| 公開(kāi)（公告）號(hào) | CN108841866B | 公開(kāi)（公告）日 | 2022-07-05 |
| 申請(qǐng)公布號(hào) | CN108841866B | 申請(qǐng)公布日 | 2022-07-05 |
| 分類(lèi)號(hào) | C12N15/861（2006.01）I;C12N15/66（2006.01）I | 分類(lèi) | 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程; |
| 發(fā)明人 | 藍(lán)田;羅燕;施金秀;王煥榮 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 | 云舟生物科技（廣州）股份有限公司 |
| 代理機(jī)構(gòu) | 廣州嘉權(quán)專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 | 代理人 | - |
| 地址 | 510663 廣東省廣州市高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)開(kāi)發(fā)區(qū)科學(xué)城掬泉路3號(hào)廣州國(guó)際企業(yè)孵化器（D區(qū)）D301-D309號(hào)房 | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 本發(fā)明公開(kāi)了提供了一種重組腺病毒載體及其構(gòu)建方法。該方法為將pRed/ET（Δα）電轉(zhuǎn)到含有pAV.Des1d載體的DB3.1感受態(tài)中，用一個(gè)包含同源臂的Kan抗性片段進(jìn)行同源重組，通過(guò)連續(xù)抗性壓力下篩選出只具有Amp+Kan抗性，而沒(méi)有Amp+Cm抗性的陽(yáng)性克隆。第二步重組用帶同源臂的attR4?Cm?ccdB?attR2或attR4?Cm?ccdB?attR3進(jìn)行重組，再利用抗性篩選出只具有Amp+Cm抗性，而沒(méi)有Amp+Kan抗性的正確的陽(yáng)性克隆，從而得到本發(fā)明腺病毒載體。本發(fā)明腺病毒表達(dá)載體，且具有很好的準(zhǔn)確性、高效性，成功率高。大大降低了人力時(shí)間成本，提高了用戶體驗(yàn)。 |
