一種大量獲得間充質(zhì)干細胞細胞生長因子的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202010915025.X 申請日 -
公開（公告）號 CN112029714A 公開（公告）日 2020-12-04
申請公布號 CN112029714A 申請公布日 2020-12-04
分類號 C12N5/0775;C07K1/34;C07K1/14 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 郭巧;張旭;王熙凱 申請（專利權(quán)）人 中康再生醫(yī)學(xué)科技（海南）有限公司
代理機構(gòu) - 代理人 -
地址 570000 海南省?？谑行阌^(qū)南海大道226號?？趪腋咝聟^(qū)創(chuàng)業(yè)孵化中心A樓5層A9-5室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種大量獲得間充質(zhì)干細胞細胞生長因子的方法，包括以下步驟：(1)間充質(zhì)干細胞的分離：通過組織貼壁或酶消化法提取間充質(zhì)干細胞；(2)低氧條件擴增培養(yǎng)：將間充質(zhì)干細胞置于低氧環(huán)境下進行培養(yǎng)；(3)用0.25％胰酶?EDTA溶液消化、用0.9％生理鹽水清洗沉淀，然后用0.9％生理鹽水調(diào)整細胞濃度，然后再加入1.5?2.5mg/mL的EDTA和6?9mg/mL的Vc，混勻離心；(4)聯(lián)合超濾濃縮：用0.22μm濾膜過濾，然后通過50KD超濾膜，收集透析液，再將透析液通過1KD濾膜，收集截留液，得到細胞因子濃縮液。本發(fā)明低氧環(huán)境誘導(dǎo)培養(yǎng)即可提高間充質(zhì)干細胞因子的含量，同時通過聯(lián)合超膜過濾可有效去除間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)液中的雜質(zhì)，從而得到的細胞因子純度高，產(chǎn)量大。