一種重組人PM/Scl100融合蛋白及其制備方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201810809491.2 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN108998461A 公開（公告）日 2018-12-14
申請(qǐng)公布號(hào) CN108998461A 申請(qǐng)公布日 2018-12-14
分類號(hào) C12N15/70;C12N15/866;C07K19/00 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 李慶春;楊陽;錢林;周延慶 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 江蘇浩歐博生物醫(yī)藥股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) 蘇州創(chuàng)元專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 代理人 江蘇浩歐博生物醫(yī)藥股份有限公司
地址 215123 江蘇省蘇州市工業(yè)園區(qū)星湖街218號(hào)生物納米園C6棟
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種重組人PM/Scl100融合蛋白的制備方法，合成人PM/Scl100基因并在兩端添加酶切位點(diǎn)后，亞克隆至克隆載體構(gòu)建重組質(zhì)粒；將重組質(zhì)粒經(jīng)限制性內(nèi)切酶消化后，在T4連接酶的作用下，與經(jīng)過相同限制性內(nèi)切酶消化后的真核表達(dá)載體連接，然后轉(zhuǎn)化大腸桿菌JM109，獲得重組載體；將重組載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH10Bac，獲得重組桿粒；將重組桿粒轉(zhuǎn)染進(jìn)入SF9細(xì)胞制得桿狀病毒；將桿狀病毒轉(zhuǎn)染進(jìn)入SF9細(xì)胞獲得重組蛋白；對(duì)重組蛋白進(jìn)行純化獲得所述的重組人PM/Scl100融合蛋白。本發(fā)明能夠高效表達(dá)、生產(chǎn)重組人PM/Scl100融合蛋白，獲得的重組人PM/Scl100融合蛋白的純度高，收率高。