一種臍帶間充質(zhì)干細胞的分離方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201911379261.8 申請日 -
公開（公告）號 CN110964693A 公開（公告）日 2020-04-07
申請公布號 CN110964693A 申請公布日 2020-04-07
分類號 C12N5/0775 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 任玲;趙俊偉;殷克然;周興旺;蔡子夢;宋健 申請（專利權(quán)）人 河北銀豐鼎誠生物技術(shù)有限公司
代理機構(gòu) 山東舜天律師事務所 代理人 李新海
地址 050000 河北省石家莊市高新區(qū)太行南大街197號A座201室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種臍帶間充質(zhì)干細胞的分離方法：(1)取新鮮臍帶，用PBS緩沖液沖洗干凈，剪成小段，剝離組織，放于組織消化液中，將小段剪成組織塊，加入氯化鈣溶液，37℃消化45分鐘，每隔15分鐘取出吹打，混勻；(2)將含組織塊的消化產(chǎn)物過篩進行過濾：過濾前先用無血清培養(yǎng)基浸濕網(wǎng)篩，過濾時將含組織塊的消化產(chǎn)物逐漸滴加過濾，過濾后用無血清培養(yǎng)基沖洗網(wǎng)篩，得到比較充分的組織塊和單細胞懸液；(3)將組織塊和單細胞懸液離心，培養(yǎng)，得臍帶間充質(zhì)干細胞。第3天已經(jīng)有很多細胞，7～8天，生長迅速，細胞處于對數(shù)生長期，細胞融合度能達到95～100％。后期進行成肌/成脂誘導分化，原代細胞分化程度很高，且細胞狀態(tài)良好。