親和層析定量檢測(cè)重組人α干擾素工藝中間體含量的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201811076860.8 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN109307771A 公開（公告）日 2019-02-05
申請(qǐng)公布號(hào) CN109307771A 申請(qǐng)公布日 2019-02-05
分類號(hào) G01N33/68;G01N33/558;C12N15/21;C12N15/70;C07K14/56;C07K1/36;C07K1/30;C07K1/18 分類 測(cè)量；測(cè)試;
發(fā)明人 楊大軍;茹莉莉;劉嫻;吳京雷;韓志剛;程永慶 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 北京三元基因藥業(yè)股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京路浩知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 北京三元基因藥業(yè)股份有限公司
地址 102600 北京市大興區(qū)工業(yè)開發(fā)區(qū)金苑路1號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及親和層析定量檢測(cè)重組人α干擾素生產(chǎn)工藝中間體含量的方法，包括：1)表達(dá)重組人α干擾素的工程菌構(gòu)建；2)發(fā)酵工程菌并分離純化以可溶性蛋白或包涵體形式表達(dá)的目的蛋白。其中蛋白純化包括粗純和精純，利用硫酸銨鹽析沉淀獲得蛋白粗品，粗品經(jīng)DEAE陰離子交換柱層析純化得到中間體，用單抗親和層析柱定量檢測(cè)中間體中重組人α干擾素的含量。本方法適于重組人α干擾素和重組集成干擾素生產(chǎn)工藝中間體的定量檢測(cè)，優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確，根據(jù)得到的干擾素濃度數(shù)據(jù)可以改進(jìn)人們對(duì)生產(chǎn)過(guò)程的認(rèn)知程度和控制程度，使得可靠、快速、直接、容易地評(píng)估干擾素生產(chǎn)關(guān)鍵環(huán)節(jié)成為可能，以實(shí)現(xiàn)精確質(zhì)量控制的目的。