一種具有生產和回收纖維素內切酶雙重功能的酵母菌株的構建

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201310579729.4 申請日 -
公開（公告）號 CN103555720B 公開（公告）日 2015-08-19
申請公布號 CN103555720B 申請公布日 2015-08-19
分類號 C12N15/11(2006.01)I;C12N15/81(2006.01)I;C12N1/19(2006.01)I;C12R1/865(2006.01)N;C12R1/68(2006.01)N 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 薛棟升;汪江波;蔡鳳嬌;曹敬華;陳茂彬;方尚玲;鎮(zhèn)達 申請（專利權）人 北京中農華威生物技術有限公司
代理機構 武漢科皓知識產權代理事務所（特殊普通合伙） 代理人 湖北工業(yè)大學;武穴市剛華技術服務中心;北京中農華威生物技術有限公司
地址 430068 湖北省武漢市武昌區(qū)南湖李家墩1村1號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種具有生產和回收纖維素內切酶雙重功能的酵母菌株的構建，屬于酶工程領域。通過把釀酒酵母TDH3啟動子序列、釀酒酵母分泌信號肽編碼序列、煙曲霉纖維素內切酶編碼序列、釀酒酵母凝聚因子C端的400個氨基酸片段編碼序列、釀酒酵母TDH3終止子序列按順序合成，在兩端加上限制性內切酶位點，通過酶切構建到pPIC9K質粒中，再將該質粒轉化到酵母中得到具有生產和回收纖維素內切酶雙重功能的酵母菌株。其生產纖維素內切酶的回收率達到86%，發(fā)酵后內切酶的酶活達到8.5?U/g濕酵母。本發(fā)明實現(xiàn)了纖維素內切酶生產和同步濃縮回收的一步完成，降低了能源消耗，降低了成本，具有較強的實用性。