一種具有生產(chǎn)和回收纖維素內(nèi)切酶雙重功能的酵母菌株的構(gòu)建

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201310579729.4 申請日 -
公開（公告）號 CN103555720A 公開（公告）日 2014-02-05
申請公布號 CN103555720A 申請公布日 2014-02-05
分類號 C12N15/11(2006.01)I;C12N15/81(2006.01)I;C12N1/19(2006.01)I;C12R1/865(2006.01)N;C12R1/68(2006.01)N 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 薛棟升;汪江波;蔡鳳嬌;曹敬華;陳茂彬;方尚玲;鎮(zhèn)達 申請（專利權(quán)）人 北京中農(nóng)華威生物技術(shù)有限公司
代理機構(gòu) 武漢科皓知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（特殊普通合伙） 代理人 湖北工業(yè)大學(xué);武穴市剛?cè)A技術(shù)服務(wù)中心;北京中農(nóng)華威生物技術(shù)有限公司
地址 430068 湖北省武漢市武昌區(qū)南湖李家墩1村1號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種具有生產(chǎn)和回收纖維素內(nèi)切酶雙重功能的酵母菌株的構(gòu)建，屬于酶工程領(lǐng)域。通過把釀酒酵母TDH3啟動子序列、釀酒酵母分泌信號肽編碼序列、煙曲霉纖維素內(nèi)切酶編碼序列、釀酒酵母凝聚因子C端的400個氨基酸片段編碼序列、釀酒酵母TDH3終止子序列按順序合成，在兩端加上限制性內(nèi)切酶位點，通過酶切構(gòu)建到pPIC9K質(zhì)粒中，再將該質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到酵母中得到具有生產(chǎn)和回收纖維素內(nèi)切酶雙重功能的酵母菌株。其生產(chǎn)纖維素內(nèi)切酶的回收率達到86%，發(fā)酵后內(nèi)切酶的酶活達到8.5U/g濕酵母。本發(fā)明實現(xiàn)了纖維素內(nèi)切酶生產(chǎn)和同步濃縮回收的一步完成，降低了能源消耗，降低了成本，具有較強的實用性。