一種利用CRISPR剪切技術(shù)提高ctDNA檢測靈敏度的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202111338700.8 申請日 -
公開（公告）號(hào) CN114395555A 公開（公告）日 2022-04-26
申請公布號(hào) CN114395555A 申請公布日 2022-04-26
分類號(hào) C12N15/113（2010.01）I;C12Q1/6886（2018.01）I;C40B50/06（2006.01）I;C12Q1/6806（2018.01）I;C12Q1/6874（2018.01）I;C12N15/11（2006.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 李小花;劉朝煜;姚旭梅 申請（專利權(quán)）人 深圳思凝一云科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京中南長風(fēng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 李青
地址 518101廣東省深圳市寶安區(qū)新安街道興東社區(qū)留仙大道2號(hào)匯聚創(chuàng)新園2棟2605
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 利用CRISPR技術(shù)剪切非突變靶點(diǎn)進(jìn)而凸顯低頻突變的方法，對DNA分子進(jìn)行建庫，設(shè)計(jì)特異性的sgRNA，添加sgRNA以及Cas9進(jìn)行體外處理，并將其與Cas9蛋白在體外結(jié)合后加入到樣品DNA中；利用CRISPR技術(shù)剪切非突變靶點(diǎn)進(jìn)而凸顯低頻突變、以NGS測序確認(rèn)該方法可以應(yīng)用于檢測低頻的ctDNA（循環(huán)腫瘤DNA）或應(yīng)用到腫瘤細(xì)胞占比低的FFPE樣本，實(shí)現(xiàn)2個(gè)或更多低頻突變位點(diǎn)的聯(lián)合檢測。