一種利用CRISPR剪切技術(shù)提高ctDNA檢測靈敏度的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202111338700.8 申請日 -
公開(公告)號 CN114395555A 公開(公告)日 2022-04-26
申請公布號 CN114395555A 申請公布日 2022-04-26
分類號 C12N15/113(2010.01)I;C12Q1/6886(2018.01)I;C40B50/06(2006.01)I;C12Q1/6806(2018.01)I;C12Q1/6874(2018.01)I;C12N15/11(2006.01)I 分類 生物化學;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學;酶學;突變或遺傳工程;
發(fā)明人 李小花;劉朝煜;姚旭梅 申請(專利權(quán))人 深圳思凝一云科技有限公司
代理機構(gòu) 北京中南長風知識產(chǎn)權(quán)代理事務所(普通合伙) 代理人 李青
地址 518101廣東省深圳市寶安區(qū)新安街道興東社區(qū)留仙大道2號匯聚創(chuàng)新園2棟2605
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 利用CRISPR技術(shù)剪切非突變靶點進而凸顯低頻突變的方法,對DNA分子進行建庫,設(shè)計特異性的sgRNA,添加sgRNA以及Cas9進行體外處理,并將其與Cas9蛋白在體外結(jié)合后加入到樣品DNA中;利用CRISPR技術(shù)剪切非突變靶點進而凸顯低頻突變、以NGS測序確認該方法可以應用于檢測低頻的ctDNA(循環(huán)腫瘤DNA)或應用到腫瘤細胞占比低的FFPE樣本,實現(xiàn)2個或更多低頻突變位點的聯(lián)合檢測。