一種用于甲基化擴增子測序的建庫方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202010835374.0 申請日 -
公開（公告）號 CN112126987A 公開（公告）日 2020-12-25
申請公布號 CN112126987A 申請公布日 2020-12-25
分類號 C40B50/06(2006.01)I;C12Q1/6858(2018.01)I 分類 組合技術〔8〕;
發(fā)明人 王俊;李小花;劉朝煜;姚旭梅 申請（專利權）人 深圳思凝一云科技有限公司
代理機構 北京中南長風知識產權代理事務所（普通合伙） 代理人 鄭海
地址 518101廣東省深圳市寶安區(qū)新安街道興東社區(qū)留仙大道2號匯聚創(chuàng)新園2棟2605
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種用于甲基化擴增子測序的建庫方法，涉及分子生物學技術領域，所述建庫方法包括以下步驟：1)第一次PCR擴增；2)一次磁珠純化；3)補平修復；4)接頭連接；5)二次磁珠純化；6)第二次PCR擴增；7)三次磁珠純化。為了解決傳統(tǒng)靶向甲基化測序中的測序文庫的構建費用過高和周期過長的問題，本發(fā)明通過利用特異性引物對重亞硫酸鹽轉化過后的DNA進行多重PCR反應得到靶向的擴增子，然后利用連接反應將NGS測序用到的接頭加至擴增子兩端純化回收形成測序文庫，有利于實現(xiàn)靶向甲基化測序，減低了測序文庫的構建費用和周期，具有廣闊的市場前景。??