一種用于甲基化擴(kuò)增子測(cè)序的建庫方法
基本信息
| 申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN202010835374.0 | 申請(qǐng)日 | - |
| 公開（公告）號(hào) | CN112126987A | 公開（公告）日 | 2020-12-25 |
| 申請(qǐng)公布號(hào) | CN112126987A | 申請(qǐng)公布日 | 2020-12-25 |
| 分類號(hào) | C40B50/06(2006.01)I;C12Q1/6858(2018.01)I | 分類 | 組合技術(shù)〔8〕; |
| 發(fā)明人 | 王俊;李小花;劉朝煜;姚旭梅 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 | 深圳思凝一云科技有限公司 |
| 代理機(jī)構(gòu) | 北京中南長(zhǎng)風(fēng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） | 代理人 | 鄭海 |
| 地址 | 518101廣東省深圳市寶安區(qū)新安街道興東社區(qū)留仙大道2號(hào)匯聚創(chuàng)新園2棟2605 | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種用于甲基化擴(kuò)增子測(cè)序的建庫方法，涉及分子生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，所述建庫方法包括以下步驟：1)第一次PCR擴(kuò)增；2)一次磁珠純化；3)補(bǔ)平修復(fù)；4)接頭連接；5)二次磁珠純化；6)第二次PCR擴(kuò)增；7)三次磁珠純化。為了解決傳統(tǒng)靶向甲基化測(cè)序中的測(cè)序文庫的構(gòu)建費(fèi)用過高和周期過長(zhǎng)的問題，本發(fā)明通過利用特異性引物對(duì)重亞硫酸鹽轉(zhuǎn)化過后的DNA進(jìn)行多重PCR反應(yīng)得到靶向的擴(kuò)增子，然后利用連接反應(yīng)將NGS測(cè)序用到的接頭加至擴(kuò)增子兩端純化回收形成測(cè)序文庫，有利于實(shí)現(xiàn)靶向甲基化測(cè)序，減低了測(cè)序文庫的構(gòu)建費(fèi)用和周期，具有廣闊的市場(chǎng)前景。?? |
