一種構(gòu)建T載體的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201010281650.X 申請日 -
公開（公告）號 CN101948862B 公開（公告）日 2012-11-21
申請公布號 CN101948862B 申請公布日 2012-11-21
分類號 C12N15/66(2006.01)I 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 李艷萍 申請（專利權(quán)）人 中生方政（天津）生物技術(shù)有限公司
代理機構(gòu) 北京集佳知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 逯長明
地址 300457 天津市開發(fā)區(qū)第四大街80號天大科技園B5
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及基因工程技術(shù)領(lǐng)域，公開了一種構(gòu)建T載體的方法。該方法以pGEM-T?Easy?Vector、pBS-T?Vector、pSURE-T?Vector為出發(fā)載體與Xcm?I盒連接得到前T載體，然后用Xcm?I限制性內(nèi)切酶酶切前T載體，回收線性化載體，得到T載體，所述Xcm?I盒序列包括間隔DNA序列和緊密連接于所述間隔DNA序列兩側(cè)的各一個附加序列，所述附加序列包括Xcm?I酶切位點序列和Xcm?I酶切位點序列5′端的3個保護堿基。本發(fā)明所述構(gòu)建T載體的方法簡單高效，所獲得的T載體質(zhì)量穩(wěn)定，自身環(huán)化率低，克隆效果高，并且可以避免3n+2個核苷酸的cDNA序列在基因表達時發(fā)生移碼。