一種構(gòu)建T載體的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201010281650.X 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN101948862A 公開（公告）日 2011-01-19
申請(qǐng)公布號(hào) CN101948862A 申請(qǐng)公布日 2011-01-19
分類號(hào) C12N15/66(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 李艷萍 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 中生方政（天津）生物技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京集佳知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 原平皓（天津）生物技術(shù)有限公司;中生方政生物技術(shù)股份有限公司
地址 300457 天津市開發(fā)區(qū)第四大街80號(hào)天大科技園B5
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及基因工程技術(shù)領(lǐng)域，公開了一種構(gòu)建T載體的方法。該方法以pGEM-T?Easy?Vector、pBS-T?Vector、pSURE-T?Vector為出發(fā)載體與Xcm?I盒連接得到前T載體，然后用Xcm?I限制性內(nèi)切酶酶切前T載體，回收線性化載體，得到T載體，所述Xcm?I盒序列包括間隔DNA序列和緊密連接于所述間隔DNA序列兩側(cè)的各一個(gè)附加序列，所述附加序列包括Xcm?I酶切位點(diǎn)序列和Xcm?I酶切位點(diǎn)序列5′端的3個(gè)保護(hù)堿基。本發(fā)明所述構(gòu)建T載體的方法簡單高效，所獲得的T載體質(zhì)量穩(wěn)定，自身環(huán)化率低，克隆效果高，并且可以避免3n+2個(gè)核苷酸的cDNA序列在基因表達(dá)時(shí)發(fā)生移碼。