一種快速測(cè)定DNA聚合酶活性的方法
基本信息
| 申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN202011002396.5 | 申請(qǐng)日 | - |
| 公開（公告）號(hào) | CN112176040A | 公開（公告）日 | 2021-01-05 |
| 申請(qǐng)公布號(hào) | CN112176040A | 申請(qǐng)公布日 | 2021-01-05 |
| 分類號(hào) | C12Q1/686(2018.01)I | 分類 | 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程; |
| 發(fā)明人 | 盧辰;羅志丹;陳曉雨;張坤曉;許恒皓;唐雨婷;陳佳玥 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 | 江蘇愚公生命科技有限公司 |
| 代理機(jī)構(gòu) | 北京和聯(lián)順知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 | 代理人 | 趙宇 |
| 地址 | 222000江蘇省連云港市海州區(qū)蒼梧路59號(hào) | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 本發(fā)明公開一種快速測(cè)定DNA聚合酶活性的方法，包括：(1)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì)算線性回歸方程：將兩種寡核苷酸探針H1和H2以不同比例混合，測(cè)量熒光值并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算線性回歸方程；(2)恒溫條件下進(jìn)行DNA聚合酶活性檢測(cè)反應(yīng)：以步驟(1)中僅含H1的工作溶液為底物，加入dNTP混合液和鎂離子，使用該DNA聚合酶對(duì)應(yīng)的反應(yīng)緩沖液，配制DNA聚合酶活性檢測(cè)反應(yīng)體系；(3)中止反應(yīng)后測(cè)定產(chǎn)物熒光值：恒溫反應(yīng)后強(qiáng)行中止反應(yīng)，降溫到室溫后測(cè)定產(chǎn)物含量，記錄30min下的熒光增加值；(4)計(jì)算酶活性：將熒光增加值代入步驟(1)中得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)應(yīng)的線性回歸方程，得出體系中產(chǎn)物的含量，計(jì)算原酶液活性。不依賴同位素，操作簡(jiǎn)單，準(zhǔn)確度和重復(fù)性好。?? |
