用于表達限制性內切酶FspI的甲基化保護菌株的篩選方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201710765015.0 申請日 -
公開（公告）號 CN107760697A 公開（公告）日 2018-03-06
申請公布號 CN107760697A 申請公布日 2018-03-06
分類號 C12N15/54;C12N15/74;C12N15/66 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 張坤曉;韓挺翰;龔雪梅;許恒皓 申請（專利權）人 江蘇愚公生命科技有限公司
代理機構 連云港潤知專利代理事務所 代理人 江蘇愚公生命科技有限公司
地址 222000 江蘇省連云港市海州區(qū)花果山大道17-1-1005至1006
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 一種用于表達限制性內切酶FspI的甲基化保護菌株的篩選方法，通過甲基轉移酶M.HhaI基因的獲取，構建甲基轉移酶M.HhaI的重組表達菌株，甲基化保護菌株的篩選，限制性內切酶FspI基因的獲取，構建限制性內切酶FspI的重組表達菌株；再限制酶FspI的重組表達，獲得限制酶FspI的重組表達菌株。本發(fā)明方法實現(xiàn)了限制酶FspI的高效重組表達；利用乳糖操縱子表達系統(tǒng)進行限制酶FspI的重組表達；抵抗限制酶FspI對宿主基因組DNA的酶切，相對無甲基化保護的表達系統(tǒng)，可穩(wěn)定且高效進行限制酶FspI的重組表達；篩選出的M.HhaI甲基化保護菌株同樣可應用于其他具有類似識別位點的限制酶的重組表達。