用于表達限制性內(nèi)切酶FspI的甲基化保護菌株的篩選方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201710765015.0 申請日 -
公開（公告）號 CN107760697A 公開（公告）日 2018-03-06
申請公布號 CN107760697A 申請公布日 2018-03-06
分類號 C12N15/54;C12N15/74;C12N15/66 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 張坤曉;韓挺翰;龔雪梅;許恒皓 申請（專利權(quán)）人 江蘇愚公生命科技有限公司
代理機構(gòu) 連云港潤知專利代理事務(wù)所 代理人 江蘇愚公生命科技有限公司
地址 222000 江蘇省連云港市海州區(qū)花果山大道17-1-1005至1006
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 一種用于表達限制性內(nèi)切酶FspI的甲基化保護菌株的篩選方法，通過甲基轉(zhuǎn)移酶M.HhaI基因的獲取，構(gòu)建甲基轉(zhuǎn)移酶M.HhaI的重組表達菌株，甲基化保護菌株的篩選，限制性內(nèi)切酶FspI基因的獲取，構(gòu)建限制性內(nèi)切酶FspI的重組表達菌株；再限制酶FspI的重組表達，獲得限制酶FspI的重組表達菌株。本發(fā)明方法實現(xiàn)了限制酶FspI的高效重組表達；利用乳糖操縱子表達系統(tǒng)進行限制酶FspI的重組表達；抵抗限制酶FspI對宿主基因組DNA的酶切，相對無甲基化保護的表達系統(tǒng)，可穩(wěn)定且高效進行限制酶FspI的重組表達；篩選出的M.HhaI甲基化保護菌株同樣可應(yīng)用于其他具有類似識別位點的限制酶的重組表達。