通過MDA-PCR富集基因組重排免疫球蛋白基因及生產(chǎn)抗體的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201110064821.8 申請日 -
公開（公告）號 CN102676532A 公開（公告）日 2012-09-19
申請公布號 CN102676532A 申請公布日 2012-09-19
分類號 C12N15/13(2006.01)I;C12N15/10(2006.01)I;C12N15/79(2006.01)I 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 蔡槱伯 申請（專利權(quán)）人 成都貝瑞和康醫(yī)學檢驗所有限公司
代理機構(gòu) 北京康信知識產(chǎn)權(quán)代理有限責任公司 代理人 北京貝瑞和康生物技術(shù)有限公司
地址 102206 北京市昌平區(qū)生命園路B-246室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種特異地擴增基因組的重排免疫球蛋白基因的方法，包括：裂解成熟的B細胞；用多重置換擴增的方法，通過能夠特異地擴增抗體重鏈和/或輕鏈的可變區(qū)的引物擴增所述B細胞的基因組基因，從而相對特異地從基因組擴增包含重鏈和/或輕鏈的可變區(qū)的序列；以所述多重置換擴增所得的反應(yīng)液為底物，用特異地結(jié)合所述抗體重鏈和/或輕鏈的可變區(qū)的引物進行PCR擴增，以獲得所述抗體重鏈或輕鏈的可變區(qū)的基因序列；對所得到的PCR產(chǎn)物測序，以確定PCR擴增得到所述抗體重鏈或輕鏈的可變區(qū)的基因序列。通過本發(fā)明的方法獲取重排的免疫球蛋白基因并利用該基因生產(chǎn)抗體。