用于PCR擴增的微量絲狀真菌高純度DNA簡易制備方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202110902289.6 申請日 -
公開（公告）號 CN114058509A 公開（公告）日 2022-02-18
申請公布號 CN114058509A 申請公布日 2022-02-18
分類號 C12N1/06（2006.01）I;C12N15/10（2006.01）I;C12Q1/6806（2018.01）I 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 劉洋;王庭璋;鐘嘯萍;王煥英;毛鵬陽 申請（專利權(quán)）人 浙江天科高新技術(shù)發(fā)展有限公司
代理機構(gòu) 杭州求是專利事務所有限公司 代理人 林松海
地址 310012浙江省杭州市黃姑山路9號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種用于PCR擴增的微量絲狀真菌高純度DNA簡易制備方法，包括以下幾個步驟：步驟一，在微型離心管中，加入0.3～0.5 mm無菌石英砂至管總體積的1/20，挑取1～3 mm2真菌菌體菌絲樣本于離心管中，加入幾丁質(zhì)酶溶液，搗碎，37℃孵育30分鐘；步驟二，加入細胞裂解液，95℃振蕩10分鐘，離心收集含有核酸的上清液；步驟三，加入磁珠，對核酸?磁珠復合物進行純化和洗脫，獲得高純度的DNA。本發(fā)明克服了提取試劑盒對樣本量的要求，解決了絲狀真菌破壁困難，DNA提取中PCR抑制因子存在導致的PCR假陰性等技術(shù)問題，實現(xiàn)了微量絲狀真菌DNA的快速高質(zhì)量低成本制備。