一種提高酪氨酸酚裂解酶催化生產(chǎn)左旋多巴效率的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201810907732.7 申請日 -
公開（公告）號 CN110055291A 公開（公告）日 2019-07-26
申請公布號 CN110055291A 申請公布日 2019-07-26
分類號 C12P13/22（2006.01）I; C12N9/88（2006.01）I 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 儲消和; 吳黎誠; 生英濤; 陳萬河; 程躍; 徐順清; 沈建; 方明山; 余煒; 柳鵬福; 孫俊杰 申請（專利權）人 浙江綠創(chuàng)生物科技有限公司
代理機構 杭州賽科專利代理事務所（普通合伙） 代理人 尹建民
地址 310014 浙江省杭州市下城區(qū)潮王路18號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種提高酪氨酸酚裂解酶催化生產(chǎn)左旋多巴效率的方法，其特征在于：(1)挑單菌落接種到含LB培養(yǎng)基的試管中，加卡那霉素(50mg/L)30?37℃，220rpm，培養(yǎng)12?16h，得到一級種子；(2)將所述一級種子接種到含發(fā)酵培養(yǎng)基的搖瓶中培養(yǎng)10?12h；(3)離心收菌，得到菌體，超聲破胞，高速離心，獲得上清酶液；(4)酶液加入底物溶液，攪勻，25℃，密封震蕩反應；所述底物溶液包括14?16g/L的丙酮酸鈉、10?12g/L的鄰苯二酚、50?60g/L的醋酸銨、2?5g/L的亞硫酸鈉、1?3g/L的EDTA，調(diào)pH7.5?8.5，反應產(chǎn)物濃度達到20g/L以上，加入10?30g/L的左旋多巴晶體，誘導產(chǎn)品提前析晶。本發(fā)明大大提高了轉(zhuǎn)化率和產(chǎn)物濃度，提高了產(chǎn)品品質(zhì)，工藝簡單，成本低廉，產(chǎn)率高，具有工業(yè)化生產(chǎn)的應用價值。