使用細胞內(nèi)同步表達法在T4噬菌體表面展示外源蛋白大分子的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201310033512.3 申請日 -
公開（公告）號 CN103074359A 公開（公告）日 2013-05-01
申請公布號 CN103074359A 申請公布日 2013-05-01
分類號 C12N15/70(2006.01)I;C12N7/01(2006.01)I;C12R1/92(2006.01)N 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 高嵩;陶攀;許恒皓;劉偉;尹欣;程斌 申請（專利權(quán)）人 連云港脂立方生物醫(yī)藥研究所有限公司
代理機構(gòu) 南京眾聯(lián)專利代理有限公司 代理人 連云港脂立方生物醫(yī)藥研究所有限公司;江蘇愚公生命科技有限公司
地址 222000 江蘇省連云港市海州區(qū)花果山大道17-1-1005至1006
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明是一種使用細胞內(nèi)同步表達法在T4噬菌體表面展示外源蛋白大分子的方法，其步驟如下：帶有T4噬菌體天然調(diào)控區(qū)的Hoc蛋白或Soc蛋白與外源蛋白融合的重組蛋白的表達質(zhì)粒的構(gòu)建；將外源重組蛋白的表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)化進入大腸桿菌細胞內(nèi)：以Hoc蛋白和Soc蛋白缺失的T4噬菌體病毒株感染含有外源重組蛋白表達質(zhì)粒的大腸桿菌細胞；分離從以上的感染步驟中產(chǎn)生的展示有外源重組蛋白的T4噬菌體顆粒；檢測所獲得的T4噬菌體顆粒的衣殼上所展示的外源重組蛋白。本發(fā)明方法無需進行外源重組蛋白的過表達，避免了體外展示法中需要外源重組蛋白大量過表達的技術(shù)瓶頸；無需進行外源重組蛋白的分離純化，避免了耗時且昂貴的蛋白分離純化過程。