使用細(xì)胞內(nèi)同步表達(dá)法在T4噬菌體表面展示外源蛋白大分子的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201310033512.3 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN103074359B 公開(kāi)（公告）日 2014-10-29
申請(qǐng)公布號(hào) CN103074359B 申請(qǐng)公布日 2014-10-29
分類(lèi)號(hào) C12N15/70(2006.01)I;C12N7/01(2006.01)I;C12R1/92(2006.01)N 分類(lèi) 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 高嵩;陶攀;許恒皓;劉偉;尹欣;程斌 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人 連云港脂立方生物醫(yī)藥研究所有限公司
代理機(jī)構(gòu) 南京眾聯(lián)專(zhuān)利代理有限公司 代理人 劉喜蓮
地址 222000 江蘇省連云港市海州區(qū)花果山大道17-1-1005至1006
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明是一種使用細(xì)胞內(nèi)同步表達(dá)法在T4噬菌體表面展示外源蛋白大分子的方法，其步驟如下：帶有T4噬菌體天然調(diào)控區(qū)的Hoc蛋白或Soc蛋白與外源蛋白融合的重組蛋白的表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建；將外源重組蛋白的表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)化進(jìn)入大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)：以Hoc蛋白和Soc蛋白缺失的T4噬菌體病毒株感染含有外源重組蛋白表達(dá)質(zhì)粒的大腸桿菌細(xì)胞；分離從以上的感染步驟中產(chǎn)生的展示有外源重組蛋白的T4噬菌體顆粒；檢測(cè)所獲得的T4噬菌體顆粒的衣殼上所展示的外源重組蛋白。本發(fā)明方法無(wú)需進(jìn)行外源重組蛋白的過(guò)表達(dá)，避免了體外展示法中需要外源重組蛋白大量過(guò)表達(dá)的技術(shù)瓶頸；無(wú)需進(jìn)行外源重組蛋白的分離純化，避免了耗時(shí)且昂貴的蛋白分離純化過(guò)程。