一種在多重PCR體系內(nèi)加入內(nèi)參定量核酸拷貝數(shù)的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201911152307.2 申請日 -
公開（公告）號 CN110724731A 公開（公告）日 2020-01-24
申請公布號 CN110724731A 申請公布日 2020-01-24
分類號 C12Q1/6851 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 浦浩;黃文潘;張亞楠;李陽 申請（專利權(quán)）人 上海冰緣醫(yī)療科技有限公司
代理機構(gòu) 北京睿智保誠專利代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 上海冰緣醫(yī)療科技有限公司
地址 201800 上海市嘉定區(qū)葉城路1288號6幢J
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種在多重PCR體系內(nèi)加入內(nèi)參定量核酸拷貝數(shù)的方法，屬于核酸分子生物學(xué)檢測技術(shù)領(lǐng)域；所述方法，包括以下步驟：1）構(gòu)建內(nèi)參和目標(biāo)基因擴增效率系數(shù)訓(xùn)練集，獲得內(nèi)參與目標(biāo)基因擴增系數(shù)之間的關(guān)系；2）在目標(biāo)基因的多重PCR體系中添加確定拷貝數(shù)的內(nèi)參以及擴增內(nèi)參的引物后，進(jìn)行兩輪多重PCR擴增后獲得測序文庫；3）對所述測序文庫進(jìn)行測序，獲得測序數(shù)據(jù)；4）分析所述測序數(shù)據(jù)獲得內(nèi)參和目標(biāo)基因的reads數(shù)，利用步驟1）中獲得的內(nèi)參與目標(biāo)基因擴增效率系數(shù)之間的關(guān)系，計算目標(biāo)基因的拷貝數(shù)。本發(fā)明所述方法能夠快速的定量樣品中特定核酸基因的拷貝數(shù)，準(zhǔn)確度高。