一種檢測BCR-ABL融合基因ABL激酶區(qū)突變的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201811636832.7 申請日 -
公開（公告）號 CN109777864A 公開（公告）日 2019-05-21
申請公布號 CN109777864A 申請公布日 2019-05-21
分類號 C12Q1/6858（2018.01）I; C12N15/11（2006.01）I; C12Q1/6886（2018.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 尤雋丹; 郝瑋; 李小青 申請（專利權(quán)）人 武漢康圣達(dá)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京路浩知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 武漢康圣達(dá)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所有限公司
地址 430000 湖北省武漢市東湖新技術(shù)開發(fā)區(qū)高新大道666號光谷生物城生物創(chuàng)新園D2-1棟
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種檢測BCR?ABL融合基因ABL激酶區(qū)突變的方法。該方法采用COLD?PCR結(jié)合二代測序的方法檢測外周血或骨髓中BCR?ABL融合基因兩種剪切型M?bcr和m?bcr中的ABL激酶區(qū)耐藥突變，即在同一體系內(nèi)先擴(kuò)增M?bcr和m?bcr的BCR?ABL融合基因，再進(jìn)行COLD?PCR擴(kuò)增ABL激酶區(qū)，并利用CLOD?PCR的原理封閉野生型模板，利用Tc溫度富集少量突變基因，同時(shí)通過二代測序的方法提高檢測靈敏度。本發(fā)明方法具有操作簡單、重復(fù)性好、高通量檢測標(biāo)本、報(bào)告時(shí)間短等特點(diǎn)，尤其適用于少量突變克隆株的檢測。使用該方法將顯著提高突變檢測的敏感度及復(fù)合突變的檢測能力。