一種雙標(biāo)法檢測(cè)精子線粒體膜電位和活性氧的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202010145558.4 申請(qǐng)日 -
公開(公告)號(hào) CN111289424A 公開(公告)日 2020-06-16
申請(qǐng)公布號(hào) CN111289424A 申請(qǐng)公布日 2020-06-16
分類號(hào) G01N15/14(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I 分類 -
發(fā)明人 曾橋;胡西陵 申請(qǐng)(專利權(quán))人 浙江星博生物科技股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) 寧波高新區(qū)核心力專利代理事務(wù)所(普通合伙) 代理人 浙江星博生物科技股份有限公司
地址 浙江省寧波市高新區(qū)新暉路139號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種雙標(biāo)法檢測(cè)精子線粒體膜電位和活性氧的方法,特點(diǎn)是包括待精液自然液化后,取5?10萬(wàn)條精子加入到37℃預(yù)熱的500μL精子培養(yǎng)緩沖液中混勻,并置于37℃水浴箱中加入10uL精子線粒體膜電位和活性氧聯(lián)合染液,混勻37℃避光孵育,5?30分鐘內(nèi)上流式細(xì)胞儀機(jī)檢測(cè)的步驟;最后分別收集三種顏色熒光信號(hào):綠色、橙色和紅色;采用流式細(xì)胞儀自帶軟件分析結(jié)果,根據(jù)綠色和橙色熒光情況,確定線粒體膜電位高低;根據(jù)紅色熒光情況,確定活性氧含量情況,優(yōu)點(diǎn)是實(shí)現(xiàn)了一次性完成精子線粒體膜電位和活性氧的檢測(cè),且操作簡(jiǎn)單、快速、重復(fù)性好。??