精子頂體酶的快速提取方法及其活性的流式檢測(cè)方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201710302258.0 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)(公告)號(hào) CN106896016B 公開(kāi)(公告)日 2020-04-21
申請(qǐng)公布號(hào) CN106896016B 申請(qǐng)公布日 2020-04-21
分類號(hào) G01N1/34;G01N15/14 分類 測(cè)量;測(cè)試;
發(fā)明人 房海燕;高攀;陳繼勇;薛志剛 申請(qǐng)(專利權(quán))人 浙江星博生物科技股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) 寧波高新區(qū)核心力專利代理事務(wù)所(普通合伙) 代理人 浙江星博生物科技股份有限公司
地址 浙江省寧波市高新區(qū)新暉路139號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)了精子頂體酶的快速提取方法及其活性的流式檢測(cè)方法,特點(diǎn)是提取方法包括將精液加入到離心管中,離心吸去精漿部份,保留下層精子沉淀,然后加入破膜液,使精子沉淀團(tuán)均勻懸浮后,離心去掉上清,然后加入提取液,使精子懸浮,再離心3收集上清,即獲得頂體酶提取物,其活性的流式檢測(cè)方法為通過(guò)多肽或蛋白微球偶聯(lián)技術(shù)和多肽或蛋白熒光標(biāo)記技術(shù),采用將頂體酶酶切底物進(jìn)行熒光標(biāo)記后連接到微球上,一定粒徑的熒光微球能被流式細(xì)胞儀所識(shí)別,熒光強(qiáng)弱直接反應(yīng)了樣本中頂體酶活性的高低,優(yōu)點(diǎn)是通過(guò)快速提取和流式檢測(cè)結(jié)合,使得檢測(cè)效率大大提高,增加了檢測(cè)的靈敏性。