一種人角膜內(nèi)皮細(xì)胞系的構(gòu)建方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN200510044143.3 申請(qǐng)日 -
公開(公告)號(hào) CN1296479C 公開(公告)日 2007-01-24
申請(qǐng)公布號(hào) CN1296479C 申請(qǐng)公布日 2007-01-24
分類號(hào) C12N5/08;C12N5/071 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 樊廷俊;付永鋒;叢日山;湯志宏;孫文杰;于秋濤;王晶;趙君 申請(qǐng)(專利權(quán))人 青島彩暉生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 青島海昊知識(shí)產(chǎn)權(quán)事務(wù)所有限公司 代理人 張中南
地址 266000 山東省青島市李滄區(qū)九水東路266號(hào)8號(hào)樓401戶
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 一種人角膜內(nèi)皮細(xì)胞系的構(gòu)建方法,它是以角膜內(nèi)皮為材料,先將角膜內(nèi)皮面朝下進(jìn)行貼板培養(yǎng),采用時(shí)間梯度連續(xù)貼膜法獲得純凈角膜內(nèi)皮細(xì)胞,在含20%胎牛血清、硫酸軟骨素氧化降解物、表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、牛眼生素的DMEM/F12培養(yǎng)液中培養(yǎng);采用胰蛋白酶消化法進(jìn)行傳代培養(yǎng)。該技術(shù)工藝科學(xué)合理,經(jīng)這種方法所獲得的傳代細(xì)胞目前已傳至第106代。本發(fā)明的角膜內(nèi)皮細(xì)胞未經(jīng)任何病毒或癌基因轉(zhuǎn)染,因此獲得的人角膜內(nèi)皮細(xì)胞沒(méi)有任何致瘤性,可望直接用于人工角膜生產(chǎn)和臨床應(yīng)用。