一種懸浮培養(yǎng)細(xì)胞單克隆篩選培養(yǎng)方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201911361000.3 申請日 -
公開（公告）號 CN111040986A 公開（公告）日 2020-04-21
申請公布號 CN111040986A 申請公布日 2020-04-21
分類號 C12N5/071 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 吳宗學(xué);李躍;王增福;李海鷹;倪嬌;趙成全;程海波;史張艷 申請（專利權(quán)）人 乾元浩生物股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京路浩知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 乾元浩生物股份有限公司
地址 100068 北京市豐臺區(qū)南四環(huán)西路188號總部基地11區(qū)20號樓
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開一種懸浮培養(yǎng)細(xì)胞單克隆篩選培養(yǎng)方法，屬于細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明通過在細(xì)胞培養(yǎng)容器內(nèi)加入明膠溶液預(yù)處理，輔助促貼壁培養(yǎng)基，馴化懸浮細(xì)胞恢復(fù)貼壁特性，待適應(yīng)貼壁后經(jīng)有限稀釋法進(jìn)行單克隆培養(yǎng)，再以懸浮馴育培養(yǎng)基進(jìn)行懸浮培養(yǎng)馴化，完成懸浮培養(yǎng)細(xì)胞單克隆篩選培養(yǎng)。本發(fā)明方法通過對懸浮細(xì)胞恢復(fù)貼壁培養(yǎng)特性，有效解決了懸浮細(xì)胞單克隆篩選培養(yǎng)的難題，細(xì)胞具有懸浮親源性，大大縮短懸浮培養(yǎng)馴化時間。本發(fā)明提供了一種促貼壁培養(yǎng)基和一種懸浮馴育培養(yǎng)基，分別可用于恢復(fù)懸浮細(xì)胞貼壁特性和輔助細(xì)胞懸浮培養(yǎng)馴化。本發(fā)明方法可以用于CHO和PK15懸浮細(xì)胞的單克隆篩選，是選擇優(yōu)質(zhì)、高效細(xì)胞基質(zhì)的有效人工篩選途徑。