一種體外篩選PD-L1的DNA核酸適配體的方法及其在癌癥診斷中的應(yīng)用
基本信息
| 申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN202080001212.5 | 申請(qǐng)日 | - |
| 公開（公告）號(hào) | CN114127293A | 公開（公告）日 | 2022-03-01 |
| 申請(qǐng)公布號(hào) | CN114127293A | 申請(qǐng)公布日 | 2022-03-01 |
| 分類號(hào) | C12N15/115（2006.01）I;C12Q1/6806（2006.01）I | 分類 | 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程; |
| 發(fā)明人 | 婁新徽;任惜嬌;李濟(jì)遠(yuǎn) | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 | 南京中科拜爾醫(yī)學(xué)技術(shù)有限公司 |
| 代理機(jī)構(gòu) | 北京展翅星辰知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 | 代理人 | 王文生 |
| 地址 | 100048北京市海淀區(qū)西三環(huán)北路105號(hào) | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 一種體外篩選程序性細(xì)胞死亡受體1?配體1（PD?L1）高親和力和特異性DNA核酸適配體的新方法，簡(jiǎn)稱內(nèi)編碼?SELEX（Encoded?SELEX）。本方法的起始隨機(jī)DNA文庫(kù)包含兩個(gè)隨機(jī)序列區(qū)域和位于其間的含有Ⅱ型限制性內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)的固定區(qū)域（即內(nèi)編碼）。利用MCP?SELEX預(yù)先富集文庫(kù)，隨后將文庫(kù)與PD?L1均相孵育，然后加入限制性內(nèi)切酶。能夠與PD?L1結(jié)合的序列，其內(nèi)編碼結(jié)構(gòu)被破壞，因而序列不被限制性內(nèi)切酶切斷，PCR擴(kuò)增得以保留。所獲得的核酸適配體具有內(nèi)編碼長(zhǎng)度越長(zhǎng)親和力越高的特點(diǎn)，便于快速遴選高親和力核酸適配體。熒光標(biāo)記的核酸適配體成功用于正常人扁桃體組織和多種腫瘤組織切片PD?L1表達(dá)水平的熒光成像，性能與抗體相當(dāng)，具有優(yōu)越應(yīng)用價(jià)值。 |
