利用大腸桿菌原核表達(dá)系統(tǒng)生產(chǎn)的小麥蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶及方法和應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201310373089.1 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN103436516B 公開（公告）日 2015-04-22
申請(qǐng)公布號(hào) CN103436516B 申請(qǐng)公布日 2015-04-22
分類號(hào) C12N9/90(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;A21D8/04(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 胡松青;張婷婷;侯軼;劉光毅;李琳 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 廣州英贊生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 廣州市華學(xué)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 宮愛鵬
地址 510555 廣東省廣州市黃埔區(qū)鳳凰三路8號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種利用大腸桿菌原核表達(dá)系統(tǒng)生產(chǎn)的小麥蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶及方法和應(yīng)用。采用技術(shù)方案是：從小麥幼葉中提取小麥總RNA，經(jīng)RT-PCR獲取wPDI基因。將目的基因連接到載體PET-30b中，構(gòu)建重組質(zhì)粒。將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入到大腸桿菌BL21感受態(tài)細(xì)胞中，在LB培養(yǎng)基中誘導(dǎo)表達(dá)，培養(yǎng)重組大腸桿菌，離心收集菌體細(xì)胞；用超聲法破碎菌體細(xì)胞后，離心后收集上清液；經(jīng)一次Ni-sepharose親和層析，獲得wPDI。本發(fā)明通過大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)，實(shí)現(xiàn)了wPDI大量表達(dá)和簡便的純化工藝；獲得的wPDI在面粉的加工品質(zhì)實(shí)驗(yàn)中顯示了良好的改善小麥加工品質(zhì)的作用，可用于面粉加工中。