一種可用于人原代細(xì)胞基因編輯的Cas9蛋白的制備方法
基本信息
申請?zhí)?/td> | CN201910745370.0 | 申請日 | - |
公開(公告)號 | CN112391367A | 公開(公告)日 | 2021-02-23 |
申請公布號 | CN112391367A | 申請公布日 | 2021-02-23 |
分類號 | C12N9/22(2006.01)I;C07K19/00(2006.01)I | 分類 | 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程; |
發(fā)明人 | 龍飛;張亞莉;岳江嫚;弓蒙蒙;胡金芳;張麗琴 | 申請(專利權(quán))人 | 西安宇繁生物科技有限責(zé)任公司 |
代理機構(gòu) | 北京領(lǐng)科知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) | 代理人 | 張丹 |
地址 | 710077陜西省西安市高新區(qū)環(huán)普科技園天谷八路528號D座西區(qū)402 | ||
法律狀態(tài) | - |
摘要
摘要 | 本發(fā)明公開了一種可用于人原代細(xì)胞基因編輯的Cas9蛋白的制備方法,尤其是涉及一種陰離子交換層析法純化Cas9蛋白的方法,使用所述方法純化得到的Cas9蛋白經(jīng)體外切割試驗證明具有體外活性,可特異切割DNA序列;同時經(jīng)過改造的Cas9蛋白N端和C端帶有核定位序列,經(jīng)電轉(zhuǎn)化進(jìn)入人原代細(xì)胞后可對特定基因進(jìn)行敲除,證明純化的Cas9蛋白具有體內(nèi)活性。?? |
