一種可用于人原代細(xì)胞基因編輯的Cas9蛋白的制備方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201910745370.0 申請日 -
公開(公告)號 CN112391367A 公開(公告)日 2021-02-23
申請公布號 CN112391367A 申請公布日 2021-02-23
分類號 C12N9/22(2006.01)I;C07K19/00(2006.01)I 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 龍飛;張亞莉;岳江嫚;弓蒙蒙;胡金芳;張麗琴 申請(專利權(quán))人 西安宇繁生物科技有限責(zé)任公司
代理機構(gòu) 北京領(lǐng)科知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 代理人 張丹
地址 710077陜西省西安市高新區(qū)環(huán)普科技園天谷八路528號D座西區(qū)402
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種可用于人原代細(xì)胞基因編輯的Cas9蛋白的制備方法,尤其是涉及一種陰離子交換層析法純化Cas9蛋白的方法,使用所述方法純化得到的Cas9蛋白經(jīng)體外切割試驗證明具有體外活性,可特異切割DNA序列;同時經(jīng)過改造的Cas9蛋白N端和C端帶有核定位序列,經(jīng)電轉(zhuǎn)化進(jìn)入人原代細(xì)胞后可對特定基因進(jìn)行敲除,證明純化的Cas9蛋白具有體內(nèi)活性。??