利用熒光定量PCR檢測(cè)人源臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞制劑中真菌的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202111610623.7 申請(qǐng)日 -
公開(公告)號(hào) CN114277105A 公開(公告)日 2022-04-05
申請(qǐng)公布號(hào) CN114277105A 申請(qǐng)公布日 2022-04-05
分類號(hào) C12Q1/6851(2018.01)I;C12Q1/6895(2018.01)I 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 陸曉;張春娟;張萬山;馬進(jìn) 申請(qǐng)(專利權(quán))人 江蘇拓弘康恒醫(yī)藥有限公司
代理機(jī)構(gòu) 南京佰騰智信知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 代理人 黃杭飛
地址 211000江蘇省南京市江寧區(qū)東山街道永勝路66號(hào)2幢
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本申請(qǐng)公開利用熒光定量PCR檢測(cè)人源臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞制劑中真菌的方法,屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域,具體包括如下步驟:(1)將人源間充質(zhì)干細(xì)胞制品進(jìn)行離心棄上清后,向沉淀中加入裂解液重懸并轉(zhuǎn)移至裂解管中進(jìn)行研磨,對(duì)真菌進(jìn)行破碎后,提取純化獲得真菌DNA;(2)對(duì)樣本DNA進(jìn)行熒光定量PCR檢測(cè);(3)通過Ct值判斷樣本的結(jié)果。由于真菌的28SrRNA具有一定的保守性,保守區(qū)序列是大部分真菌所共有的;通過設(shè)計(jì)28srRNA的特異性上游引物、下游引物及熒光探針,采用熒光探針法實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)可提高檢測(cè)的特異性并且能大大縮短檢測(cè)時(shí)間。