一種牙源性干細(xì)胞的培養(yǎng)與外泌體分離方法
基本信息
| 申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN202011371809.7 | 申請(qǐng)日 | - |
| 公開（公告）號(hào) | CN112458045A | 公開（公告）日 | 2021-03-09 |
| 申請(qǐng)公布號(hào) | CN112458045A | 申請(qǐng)公布日 | 2021-03-09 |
| 分類號(hào) | C12N5/0775(2010.01)I | 分類 | 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程; |
| 發(fā)明人 | 于金華;閆朝婷;周洲;吳錦濤;景雙林;閆明;李澤漢 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 | 江蘇省鹽業(yè)集團(tuán)有限責(zé)任公司 |
| 代理機(jī)構(gòu) | 南京天華專利代理有限責(zé)任公司 | 代理人 | 瞿網(wǎng)蘭 |
| 地址 | 210029江蘇省南京市漢中路136號(hào) | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 一種牙源性干細(xì)胞的培養(yǎng)與外泌體分離方法，其特征是包括以下步驟：1）配置外泌體分離用的培養(yǎng)基并在4℃以下保存；2）取傳代至3?7代的DPSC為實(shí)驗(yàn)對(duì)象開始進(jìn)行實(shí)驗(yàn)；3）經(jīng)過24小時(shí)培養(yǎng)，收集細(xì)胞上清，為最大程度回收，用1?2ml無菌PBS洗培養(yǎng)皿兩遍，PBS沖洗液+細(xì)胞上清作為分離外泌體的對(duì)象；4）上一步驟收集的液體在4℃溫度下差速離心去除細(xì)胞碎片及死細(xì)胞，若液體量少凍至?80℃冰箱待液體充足后進(jìn)行下一步；5）用規(guī)格為0.22μm的濾器去除較大的細(xì)胞外囊泡及其他雜質(zhì)；6）用規(guī)格為100KDa超濾管，在4℃，4000*g,30min條件下進(jìn)行超濾，去除較小的雜質(zhì)并濃縮得到濃縮液；7）將濃縮液加入外泌體提取得到外泌體。本發(fā)明方法簡(jiǎn)單，成本低，效果好。?? |
