一種牙源性干細胞的培養(yǎng)與外泌體分離方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202011371809.7 申請日 -
公開（公告）號 CN112458045A 公開（公告）日 2021-03-09
申請公布號 CN112458045A 申請公布日 2021-03-09
分類號 C12N5/0775(2010.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 于金華;閆朝婷;周洲;吳錦濤;景雙林;閆明;李澤漢 申請（專利權(quán)）人 江蘇省鹽業(yè)集團有限責(zé)任公司
代理機構(gòu) 南京天華專利代理有限責(zé)任公司 代理人 瞿網(wǎng)蘭
地址 210029江蘇省南京市漢中路136號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 一種牙源性干細胞的培養(yǎng)與外泌體分離方法，其特征是包括以下步驟：1）配置外泌體分離用的培養(yǎng)基并在4℃以下保存；2）取傳代至3?7代的DPSC為實驗對象開始進行實驗；3）經(jīng)過24小時培養(yǎng)，收集細胞上清，為最大程度回收，用1?2ml無菌PBS洗培養(yǎng)皿兩遍，PBS沖洗液+細胞上清作為分離外泌體的對象；4）上一步驟收集的液體在4℃溫度下差速離心去除細胞碎片及死細胞，若液體量少凍至?80℃冰箱待液體充足后進行下一步；5）用規(guī)格為0.22μm的濾器去除較大的細胞外囊泡及其他雜質(zhì)；6）用規(guī)格為100KDa超濾管，在4℃，4000*g,30min條件下進行超濾，去除較小的雜質(zhì)并濃縮得到濃縮液；7）將濃縮液加入外泌體提取得到外泌體。本發(fā)明方法簡單，成本低，效果好。??