BstDNA聚合酶重組突變體、其編碼DNA及超快磁珠LAMP檢測方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202111146868.9 申請日 -
公開（公告）號 CN113583996B 公開（公告）日 2022-01-14
申請公布號 CN113583996B 申請公布日 2022-01-14
分類號 C12N9/12（2006.01）I;C12N9/96（2006.01）I;C12N15/54（2006.01）I;C12N15/11（2006.01）I;C12Q1/6844（2018.01）I;C07K14/00（2006.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 馬海玲;江翱;陳晶晶;柴常升;侯策;曹振;孫曉亮;宋東亮 申請（專利權(quán)）人 翌圣生物科技（上海）股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) 蘇州根號專利代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 朱華慶
地址 200120上海市浦東新區(qū)天雄路166弄1號樓402室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明在野生型Bst DNA聚合酶序列上進(jìn)行了四個點位的突變，然后將進(jìn)行點突變后的Bst DNA聚合酶的292?305的氨基酸替換成DPLPDLIHPRTLRL，在突變后Bst DNA聚合酶序列的C端融合了一個DNA結(jié)合蛋白，N端融合了一個HP47多肽序列，在HP47多肽序列前面融合了一個CL7?SUMO?Tag，得到Bst DNA聚合酶重組突變體Super?Bst。Super?Bst在熱穩(wěn)定性、特異性、鏈置換能力、延伸能力和逆轉(zhuǎn)錄酶活性上得到了顯著地提升，能夠耐受高鹽和各類抑制劑，且可以通過原核表達(dá)和親和純化大量獲得。本發(fā)明還公開了其編碼DNA，以及一種超快磁珠LAMP檢測方法。