一種檢測多個(gè)樣品時(shí)測序文庫的構(gòu)建方法及其應(yīng)用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201910056472.1 申請日 -
公開（公告）號 CN109797437A 公開（公告）日 2019-05-24
申請公布號 CN109797437A 申請公布日 2019-05-24
分類號 C40B50/06（2006.01）I; C12Q1/6806（2018.01）I 分類 組合技術(shù)〔8〕;
發(fā)明人 周騁 申請（專利權(quán)）人 北京愛普益生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京知呱呱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 北京愛普益生物科技有限公司
地址 100176 北京市大興區(qū)經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)地盛東路1號愛普益大廈5層
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種檢測多個(gè)樣品時(shí)測序文庫的構(gòu)建方法及其應(yīng)用，該構(gòu)建方法包括：步驟一、根據(jù)基因組DNA序列分別設(shè)計(jì)上游引物和下游引物；步驟二、在每條上游引物上添加A接頭和第一標(biāo)簽，得到上游融合引物，在每條下游引物上添加P接頭和第二標(biāo)簽，得到下游融合引物，并將上游融合引物與下游融合引物混合得到混合融合引物；步驟三、將混合融合引物、基因組DNA、含有Mg2+，dNTPs，Taq酶的Tris?HCl緩沖液和無核酸酶水配制成多重PCR反應(yīng)體系；步驟四、將得到的多重PCR反應(yīng)體系進(jìn)行PCR反應(yīng)、純化得到多樣品測序文庫；本發(fā)明構(gòu)建方法通過上下游引物上不同標(biāo)簽組合識別樣品，能夠大大降低引物合成量，此外，還能夠減少擴(kuò)增次數(shù)，有效降低樣品間的數(shù)據(jù)不均衡。