一種基于組蛋白甲基化水平的修飾提高牛克隆效率的載體、細胞及方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201511025413.6 申請日 -
公開（公告）號 CN105524940B 公開（公告）日 2019-04-05
申請公布號 CN105524940B 申請公布日 2019-04-05
分類號 C12N15/85（2006.01）I; C12N5/10（2006.01）I; C12N15/873（2010.01）I 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 張涌; 劉鑫; 蘇建民; 高明清; 王勇勝; 孫洪政 申請（專利權）人 楊凌科元克隆股份有限公司
代理機構 北京慕達星云知識產(chǎn)權代理事務所（特殊普通合伙） 代理人 崔自京
地址 712100 陜西省西安市楊凌示范區(qū)邰城路3號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種基于組蛋白甲基化水平的修飾提高牛克隆效率的載體、細胞及方法。本發(fā)明提供的載體包括阻遏物表達載體和含有阻遏操縱子的表達載體，在轉染時將兩者共轉染到供體細胞中；所述的含有阻遏操縱子的表達載體中插入有牛KDM4B或牛KDM4C基因。將陽性轉染的細胞作為供體細胞，再將其注入到去核后的卵母細胞并進行電融合，挑選成功融合的牛體細胞克隆胚培養(yǎng)至36h時，誘導表達牛KDM4B和KDM4C。本發(fā)明可以有效減弱體細胞克隆胚在合子激活時期的組蛋白H3K9me3表觀遺傳修飾水平，從而顯著提高后期牛體細胞克隆囊胚的發(fā)育率和質量，可高效體外生產(chǎn)牛體細胞克隆胚胎，胚胎移植后克隆牛的出生率也顯著提高。