一種基于組蛋白甲基化水平的修飾提高牛克隆效率的載體、細(xì)胞及方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201511025413.6 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN105524940A 公開(kāi)（公告）日 2016-04-27
申請(qǐng)公布號(hào) CN105524940A 申請(qǐng)公布日 2016-04-27
分類號(hào) C12N15/85(2006.01)I;C12N5/10(2006.01)I;C12N15/873(2010.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 張涌;劉鑫;蘇建民;高明清;王勇勝;孫洪政 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 楊凌科元克隆股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) 西安智大知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所 代理人 劉國(guó)智
地址 712100 陜西省西安市楊凌示范區(qū)邰城路3號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)了一種基于組蛋白甲基化水平的修飾提高?？寺⌒实妮d體、細(xì)胞及方法。本發(fā)明提供的載體包括阻遏物表達(dá)載體和含有阻遏操縱子的表達(dá)載體，在轉(zhuǎn)染時(shí)將兩者共轉(zhuǎn)染到供體細(xì)胞中；所述的含有阻遏操縱子的表達(dá)載體中插入有牛KDM4B或牛KDM4C基因。將陽(yáng)性轉(zhuǎn)染的細(xì)胞作為供體細(xì)胞，再將其注入到去核后的卵母細(xì)胞并進(jìn)行電融合，挑選成功融合的牛體細(xì)胞克隆胚培養(yǎng)至36h時(shí)，誘導(dǎo)表達(dá)牛KDM4B和KDM4C。本發(fā)明可以有效減弱體細(xì)胞克隆胚在合子激活時(shí)期的組蛋白H3K9me3表觀遺傳修飾水平，從而顯著提高后期牛體細(xì)胞克隆囊胚的發(fā)育率和質(zhì)量，可高效體外生產(chǎn)牛體細(xì)胞克隆胚胎，胚胎移植后克隆牛的出生率也顯著提高。