一種基于TALEN介導(dǎo)的基因打靶敲除山羊BLG的載體及重組細(xì)胞

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201510131862.2 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN104726495B 公開(kāi)（公告）日 2018-06-19
申請(qǐng)公布號(hào) CN104726495B 申請(qǐng)公布日 2018-06-19
分類(lèi)號(hào) C12N15/85;C12N15/55;C12N15/12;C12N5/10;C12N15/873 分類(lèi) 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 張涌;靳亞平;崔趁趁;劉軍;葛恒濤;宋玉潔 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人 楊凌科元克隆股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京慕達(dá)星云知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（特殊普通合伙） 代理人 崔自京
地址 712100 陜西省西安市楊凌示范區(qū)邰城路3號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)了一種基于TALEN介導(dǎo)的基因打靶敲除山羊BLG的載體及重組細(xì)胞。本發(fā)明根據(jù)山羊β?乳球蛋白基因，設(shè)計(jì)并構(gòu)建了針對(duì)其第一外顯子的TALEN真核表達(dá)載體以及含有較短同源臂的BLG基因敲除載體，與以TALEN表達(dá)載體為模板體外轉(zhuǎn)錄的mRNAs共同轉(zhuǎn)染山羊胎兒成纖維細(xì)胞，經(jīng)藥物篩選及鑒定后得到β?乳球蛋白基因敲除細(xì)胞。本發(fā)明利用TALEN技術(shù)大大提高了基因打靶效率，同時(shí)較短同源臂的利用可以更方便高效的進(jìn)行中靶細(xì)胞的篩選，mRNAs的利用則避免了TALEN表達(dá)載體在基因組中的隨機(jī)整合。