一種蛋白包涵體及重組人β-神經(jīng)生長因子的制備方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201910390559.2 申請日 -
公開（公告）號 CN110093394A 公開（公告）日 2019-08-06
申請公布號 CN110093394A 申請公布日 2019-08-06
分類號 C12P21/06;C07K14/48;C07K1/113;C07K1/16 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 李樹剛;張偉;王傳勝;鄧永康;龔會英;柴新娟;但國平;程丹凝;余英鵬 申請（專利權(quán)）人 重慶科潤生物醫(yī)藥研發(fā)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 重慶志合專利事務(wù)所（普通合伙） 代理人 重慶科潤生物醫(yī)藥研發(fā)有限公司
地址 401121 重慶市北部新區(qū)高新園黃山大道水星科技發(fā)展中心北翼廠房5樓1號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種蛋白包涵體及重組人β?神經(jīng)生長因子的制備方法，對含腸激酶酶切位點(diǎn)的重組人β?神經(jīng)生長因子前體蛋白的包涵體進(jìn)行色譜復(fù)性，得到復(fù)性前體蛋白，即蛋白包涵體；對復(fù)性前體蛋白進(jìn)行腸激酶酶切，得到酶解產(chǎn)物；對酶解產(chǎn)物進(jìn)行分離純化。本發(fā)明將色譜法應(yīng)用到rhpro?NGF包涵體復(fù)性中，相比于傳統(tǒng)的稀釋復(fù)性方法，顯著提高復(fù)性率，縮短復(fù)性時間，使后續(xù)純化更簡單，獲得結(jié)構(gòu)正確高純度產(chǎn)品，能夠減少蛋白質(zhì)互相聚集的機(jī)會，打破復(fù)性變性反應(yīng)平衡，使復(fù)性反應(yīng)持續(xù)進(jìn)行，以較高的蛋白復(fù)性濃度進(jìn)行，便于去除變性劑，集成復(fù)性與純化過程，可以實(shí)現(xiàn)自動化、規(guī)?；瑢游鼋橘|(zhì)可以重復(fù)使用，降低工藝成本，更利于將來產(chǎn)業(yè)化的大規(guī)模生產(chǎn)。