一種基于多重PCR富集循環(huán)腫瘤DNA的方法和試劑盒

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201910402310.9 申請(qǐng)日 -
公開(公告)號(hào) CN110117574B 公開(公告)日 2021-03-23
申請(qǐng)公布號(hào) CN110117574B 申請(qǐng)公布日 2021-03-23
分類號(hào) C12N5/09(2010.01)I;C12Q1/686(2018.01)I 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 蔡微菁;徐澤 申請(qǐng)(專利權(quán))人 常州桐樹生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 上海元好知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 賈慧琴;劉琰
地址 213149江蘇省常州市常州西太湖科技產(chǎn)業(yè)園長(zhǎng)揚(yáng)路9號(hào)B2棟2樓
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種基于多重PCR富集循環(huán)腫瘤DNA的方法和試劑盒,所述的方法包含:步驟(1),設(shè)計(jì)若干PCR引物對(duì),PCR引物包含:一段用于擴(kuò)增基因目標(biāo)區(qū)域的擴(kuò)增引物序列、及一段引物連接序列;所述的引物連接序列用于與測(cè)序平臺(tái)的通用測(cè)序接頭連接;步驟(2),取含有循環(huán)腫瘤DNA的模板,并將所述模板和步驟(1)所述的PCR引物對(duì)一起進(jìn)行第一次PCR反應(yīng),獲得第一次PCR反應(yīng)產(chǎn)物;步驟(3),在所述的第一次PCR反應(yīng)產(chǎn)物中加入組合酶,以消化殘留的PCR引物;步驟(4),將通用測(cè)序接頭加入到第一次PCR反應(yīng)產(chǎn)物中,進(jìn)行第二次PCR反應(yīng),以獲得測(cè)序文庫。本發(fā)明具有降低樣本損失的效果。??